抗原抗體結合反應的特異性稱為特異性，這是由于抗體高變區的抗原表位與抗原結合點在化學結構和空間結構上的互補關系。 表位結構的微小差異將阻止兩者的特異性結合。 如果兩種不同的抗原分子具有相同的表位，則針對一種抗原的抗血清可以與另一種抗原發生反應，即交叉反應（）。 這是因為天然抗原的表面往往具有多種抗原表位，每種表位都可以刺激機體產生一種特異性抗體，即一種抗原分子可以刺激機體產生多種特異性抗體。 一般來說，多克隆抗體比單克隆抗體更容易發生交叉反應。

在抗原抗體反應中，只有當兩個分子的比例合適時才會發生強烈的反應，有時也稱為抗原抗體反應的等效帶（）。 如果一側過量，則早于過量一側的結合價不能完全被占據，多以游離小分子復合物的形式存在，或者形成的復合物容易解離，肉眼看不到。 等價條帶前后分別有抗體過量和抗原過量條帶。 此時兩者比例不合適，沉淀量少，上清液中可檢出游離抗原或抗體； 當抗體過多時，為前區現象（Prezone），當抗原過多時，為后區現象（ ）。 如果兩個比例合適，抗體分子的兩個Fab片段就會與兩個抗原表位結合并相互交聯，形成一個巨大的具有三維結構的網格狀復合物。 反應體系中基本沒有游離的抗原或抗體。 形成肉眼可辨別的沉淀物或凝集物。 當兩者的比例不合適時，只能形成較小的沉淀物或可溶性絡合物。

抗原與抗體的結合取決于兩個因素：一是抗體與相應抗原的親和力；二是抗體與相應抗原的親和力。 二是環境因素對綜合體的影響。 高親和力抗體上的抗原結合點與抗原表位在空間構型上非常合適。 兩者結合牢固，不易分離； 抗原抗體復合物在低pH、高鹽濃度、反復凍融等外界條件下也能解離，解離的抗原抗體仍保持其原有的結構、活性和特異性。 其中，改變pH和離子強度是常用的促進解離的方法，從而可以利用親和層析的方法來純化抗原或抗體。

影響抗原抗體反應的因素很多，主要包括其自身性質和外部實驗條件。

1 抗原和抗體的性質

抗原抗體反應的整體強度由三個因素控制：抗體對表位的內在親和力、抗原抗體的結合價以及參與反應的組分的三維結構。 其中，親和力和特異性是反應的關鍵因素。

2電解質

抗原與抗體特異性結合后，由親水膠體變為疏水膠體，電解質的存在會使抗原抗體復合物失去電荷而沉淀或凝集，出現肉眼可見的反應。 常用0.85%氯化鈉或各種緩沖溶液作為抗原和抗體的稀釋劑，以中和膠體顆粒上的電荷，促進抗原抗體復合物從溶液中沉淀，形成肉眼可見的沉淀或聚集體。

3 酸堿度

蛋白質具有兩性電離的性質，抗原和抗體的反應必須在合適的pH環境下進行。 一般pH=6.0~8.0，超出此范圍會影響抗原、抗體的理化性質，造成假陰性反應。

4 溫度

一定范圍內適當的溫度，會增加抗原抗體分子的運動，增加分子碰撞的機會，加快反應速度。 一般抗原和抗體的溫度為37℃。 如果溫度高于50℃，結合的抗原和抗體就會解離變性； 溫度太低，反應速度會減慢。 然而，有些抗原抗體反應有其獨特的適宜溫度。 例如，冷凝集素在 4°C 左右與紅細胞結合良好，但在 20°C 以上則解離。 另外，適當的搖動或攪拌也可以促進抗原和抗體分子的接觸，加速反應。

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2004-08-16